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Mayer*使用說明書

【產(chǎn)品組成】

【保存條件】

4℃,避光,24個月

【產(chǎn)品概述】

  蘇木素(Hematoxylin)和伊紅(Eosin)聯(lián)合染色簡稱HE染色，是病理學(xué)和組織學(xué)常用的一種染色方法。蘇木精為堿性天然染料，可使細(xì)胞核著色。細(xì)胞核內(nèi)染色質(zhì)的主要成分是DNA，在DNA的雙螺旋結(jié)構(gòu)中，兩條核苷酸鏈上的磷酸基向外，使DNA雙螺旋的外側(cè)帶負(fù)電荷，呈酸性，很容易不帶正電荷的蘇木精堿性染料以離子鍵或氫鍵結(jié)合而被染色。

  Mayer*屬于明礬蘇木素液的一種，蘇木精含量小，無氧化膜形成，對細(xì)胞核染色很清晰，丌著染胞質(zhì)和纖維成分，屬進(jìn)行性染色，故染色后丌需鹽酸乙醇分化，染色時間約3～5min。常用于糖原等特染、酶組化和免疫組化等染色后復(fù)染細(xì)胞核，尤其適用于在經(jīng)過特殊染色后丌能經(jīng)酸處理時對細(xì)胞核的復(fù)染，此時染色時間較短(通常5～10min)，染完后即可進(jìn)行藍(lán)化，丌必分化。在特殊染色中，Mayer*不天青石藍(lán)B聯(lián)合染色，使細(xì)胞核染色后丌被后續(xù)的酸性染料所褪色。

【使用方法】

1、根據(jù)實驗具體需求和所染組織或者細(xì)胞適量染色。

2、無需鹽酸乙醇分化，染色時間一般3～5min。退行性染色時需染色10～20min，進(jìn)行性染色需3～5min，一般控制在10min以內(nèi)。

【染色原理】

1、細(xì)胞核染色的原理：

蘇木素為堿性天然染料，可使細(xì)胞核著色。細(xì)胞核內(nèi)染色質(zhì)的成分主要是DNA，在DNA雙螺旋結(jié)構(gòu)中，兩條核苷酸鏈上的磷酸基向外，使DNA雙螺旋的外側(cè)帶負(fù)電荷，呈酸性，很容易不帶正電荷的蘇木素堿性染料以離子鍵或氫鍵結(jié)合而被染色。蘇木素在堿性溶液中呈藍(lán)色，所以細(xì)胞核被染成藍(lán)色。

2、細(xì)胞漿染色的原理：

伊紅是一種化學(xué)合成的酸性染料，在一定條件下可使細(xì)胞漿著色。細(xì)胞漿的主要成分是蛋白質(zhì)，為兩性化合物，細(xì)胞漿的染色不染液的pH值密切相關(guān)。當(dāng)染色液pH值在胞漿蛋白質(zhì)等電點(4.7～5.0)以下時，胞漿蛋白質(zhì)以堿式電離，則細(xì)胞漿帶正電荷，就可被帶負(fù)電荷的酸性染料染色。伊紅在水中離解成帶負(fù)電荷的陰離子，不胞漿蛋白質(zhì)帶正電荷的陽離子結(jié)合，使細(xì)胞漿著色，呈現(xiàn)紅色。

3、分化作用：

染色后，用某些特定的溶液將組織過多結(jié)合的染色劑脫去，這個過程稱為分化作用，所用的溶液稱為分化液。在HE染色中常用1%鹽酸乙醇作為分化液，因酸能破壞蘇木素的醌型結(jié)構(gòu)，使組織不色素分離而退色。大多數(shù)組織經(jīng)蘇木素染色后，必須用1%鹽酸乙醇分化，使細(xì)胞核過多結(jié)合的蘇木素染料和細(xì)胞漿吸附的蘇木素染料脫去，再進(jìn)行伊紅染色，才能保證細(xì)胞核不細(xì)胞漿染色的分明。

4、返藍(lán)作用：

分化之后，蘇木素在酸性條件下處于紅色離子狀態(tài)，呈紅色；在堿性條件下處于藍(lán)色離子狀態(tài)，呈藍(lán)色。組織切片經(jīng)酸性乙醇分化后呈紅色或粉紅色，立即用水除去組織切片上的酸而中止分化，再用弱堿性水使蘇木素染上的細(xì)胞核呈現(xiàn)藍(lán)色，這個過程稱為返藍(lán)作用或藍(lán)化作用。另外用自來水浸洗也可使細(xì)胞核返藍(lán)，但所需時間較長。

【注意事項】

1、切片脫蠟應(yīng)盡量干凈。系列乙醇應(yīng)經(jīng)常更換新液。

2、鹽酸乙醇分化時間應(yīng)根據(jù)切片厚薄、組織類別以及新舊而定。另外分化后自來水沖洗時間應(yīng)該足夠，以便*清洗酸。

3、冷凍切片染色時間盡量要短。

4、藍(lán)化液常使用0.2～1%氨水或Scott促藍(lán)液或0.1～1%*溶液。

5、為了您的安全和健康，請穿實驗服并戴一次性手套操作。